Identifikacija determinant fitnesa celic gama delta T za imunoterapijo raka preko njihovega imunoprofiliranja pri bolnikih z imunsko pogojenimi boleznimi

Terapija s celicami CAR (himerni antigenski receptor)-T je klinično odobren pristop imunoterapije raka z uporabo gensko spremenjenih celic in predstavlja spremembo paradigme zdravljenja določenih krvnih rakov, na druge razpoložljive možnosti zdravljenja. Klinično odobrene celice CAR-T so ustvarjene iz avtolognih (bolniku lastnih) celic T in so trenutno osredotočene na αβ podskupino celic T. Uspeh celic CAR-T se srečuje s številnimi izzivi povezanimi z učinkovitostjo, varnostjo in široko dostopnostjo. Eden od pristopov za reševanje teh izzivov je uporaba alternativnih imunskih celic za ustvarjanje celic CAR-T. V naši raziskovalni skupini so naše zanimanje vzbudile celice γδ T in sicer zaradi njihovih edinstvenih lastnosti, kot je proti tumorska aktivnost, neodvisna od običajne od MHC (poglavitni kompleks tkivne skladnosti)-odvisne poti procesiranja in predstavitve antigenov, ter kombinacije funkcij, značilnih za celice T, celice NK in antigen-predstavitvene celice. Čeprav so se celice γδ T izkazale kot zelo zanimivi efektorji za ustvarjanje celic CAR-T za imunoterapijo raka, je lahko njihova učinkovitost v določenih primerih omejena. Primer sta krajša obstojnost in omejeno delovanje v primerjavi s celicami αβ CAR-T, kar so opazili pri določenem modelu. To nas je vodilo do hipoteze, da so intrinzične funkcije in disfunkcije lahko ključni dejavnik za uspešeno delovanje celic γδ CAR-T. V primerjavi s celicami αβ CAR-T so ključne determinante, ki opredeljujejo uspešne terapevtske rezultate, pri celicah γδ CAR-T bistveno manj poznane. Ta izziv je potrebno premostiti, da bi odkrili potencial celic γδ CAR-T kot platforme, ki lahko deluje v primerih, kjer imajo celice αβ CAR-T omejeno aktivnost. Klinični partnerji pri tem projektu so opazili veliko povečanje frekvence celic γδ T v periferni krvi nekaterih bolnikov z atopijskim dermatitisom (AD) in prirojenimi okvarami imunosti (POI). Ta nenavadna ugotovitev nas je spodbudila, da raziščemo mehanizme, ki vodijo do povečanja frekvence, ki bi lahko bila patološka v kontekstu AD in IEI, vendar je edinstvena z vidika biologije celic γδ T. Predvidevamo, da lahko s preučevanjem celic γδ T v tej edinstveni skupini bolnikov pridobimo nove vpoglede v biologijo celic γδ T, kar bo omogočilo razvoj γδ CAR-T celičnih produktov z izboljšano funkcionalnostjo in obstojnostjo za zdravljenje raka. Poleg tega nam bo ta pristop k raziskavi omogočil, da raziščemo potencialne povezave med patološko manifestacijo povečane frekvence celic γδ T pri AD in IEI, kar bi lahko izboljšalo prepoznavanje, spremljanje in zdravljenje teh bolezni. Naš projekt je razdeljen na tri cilje: V prvem cilju bomo izvedli klinično študijo pri pediatričnih bolnikih z AD in POI, pri katerih je bila opažena povečana frekvenca celic γδ T. Razvili in validirali bomo celovit panel spektralne pretočne citometrije za karakterizacijo njihovih imunofenotipov. V drugem cilju bomo ta panel uporabili za preučevanje imunofenotipov celic γδ T in identifikacijo determinant, povezanih s povečano frekvenco. Nato bomo na izoliranih celicah γδ T izvedli RNA sekvenciranje, z namenom bolje razumeti mehanizme, na katerih temelji povečana frekvenca. Kot tretji cilj bomo ovrednotili fitnes in delovanje celic γδ CAR-T, ustvarjenih iz celic γδ T, pridobljenih iz bolnikov.