Projekti / Programi
Lanosterolna 14alfa-demetilaza v biosintezi holesterola in signalnih sterolov
| Koda |
Veda |
Področje |
Podpodročje |
| 1.05.00 |
Naravoslovje |
Biokemija in molekularna biologija |
|
| Koda |
Veda |
Področje |
| P004 |
Naravoslovno-matematične vede |
Biokemija, presnova |
| P320 |
Naravoslovno-matematične vede |
Nukleinske kisline, sinteza beljakovin |
| P340 |
Naravoslovno-matematične vede |
Lipidi, steroidi, membrane |
lanosterolna 14alfa-demetilaza, citokrom P450, uravnavanje izražanja genov, transkripcija, biosinteza holesterola, steroli MAS
Raziskovalci (5)
| št. |
Evidenčna št. |
Ime in priimek |
Razisk. področje |
Vloga |
Obdobje |
Štev. publikacijŠtev. publikacij |
| 1. |
18622 |
dr. Nataša Debeljak |
Biokemija in molekularna biologija |
Raziskovalec |
2002 - 2004 |
243 |
| 2. |
18992 |
dr. Martina Fink |
Biokemija in molekularna biologija |
Raziskovalec |
2002 - 2004 |
125 |
| 3. |
20347 |
dr. Klementina Fon Tacer |
Metabolne in hormonske motnje |
Raziskovalec |
2002 - 2004 |
126 |
| 4. |
06135 |
dr. Radovan Komel |
Biokemija in molekularna biologija |
Raziskovalec |
2002 - 2004 |
1.054 |
| 5. |
06013 |
dr. Damjana Rozman |
Biokemija in molekularna biologija |
Vodja |
2002 - 2004 |
888 |
Organizacije (1)
Povzetek
Lanosterolna 14a-demetilaza (CYP51) je encim, ki pretvarja lanosterol v mejozo aktivirajoči sterol folikularne tekočine FF-MAS. MAS so intermediati v biosintezi holesterola in signalni steroli, ke se kopičijo v gonadah. Izražanja gena CYP51 je uravnavano prvenstveno na nivoju transkripcije. Uravnavanje preko transkripcijskih faktorjev družine SREBP vodi do prekomernega izražanja gena CYP51 koordinirano z drugimi holesterogenimi geni, in vodi do povečane sinteze holesterola v jetrih. V nasprotju z jetri pa v moških spolnih celicah (spermatidah) obstaja od holesterola-neodvisno uravnavanje gena CYP51. Izgleda, de ne-koordinirano uravnavanje celotne poti biosinteze holesterola vodi do kopičenja sterolov MAS. Cilj predlaganega projekta je: 1. študij molekularnih mehanizmov, ki vodijo do sinteze mejozo aktivirajočih sterolov in/ali holesterola, na nivoju uravnavanja izražanja genov, izražanja proteinov, encimskih aktivnosti in znotrajceličnega transporta. Raziskali bomo regulatorne poti, ki so vključene v uravnavanje holesterogenih genov, s poudarkom na uravnavanju gena CYP51. Podrobno bomo raziskali od cAMP-odvisni mehanizem, ki vodi do aktivacije prepisovanja gena CYP51 v spermatidah. Izmerili bomo količino holesterola in njegovih intermediatov v živalskih tkivih in v celičnih kulturah, kjer bomo aktivirali različne signalne poti. Določili bomo aktivnost encima CYP51 v subcelularnih frakcijah spermatid. Pripravili bomo fuzijski protein CYP51 in zelenega fluorescina (CYP51-GFP) in spremljali njegovo znotrajcelično pot. 2. priprava miške s pogojno izničenim genom Cyp51, za ugotavljanje ‘in vivo’ vloge gena CYP51 in sterolov MAS v reprodukciji. Uporabili bomo strategijo Cre/loxP in pripravili miško, ki bo imela gen CYP51 izničen le v spermatidah spolno dozorelih živali, saj bo do izrezovanja prišlo šele po križanju Cyp51loxP samičke s Sycp1-Cre samcem. Razkritje tkivne-specifičnosti sinteze holesterola in sterolov MAS bo prispevalo k boljšemu razumevanju mehanizmov, ki so vključeni v razvoj kardiovaskularnih in reproduktivnih obolenj in lahko privede do razvoja novih strategij zdravljenja.
