Nalaganje ...
Projekti / Programi vir: ARIS

Lanosterolna 14alfa-demetilaza v biosintezi holesterola in signalnih sterolov

Raziskovalna dejavnost

Koda Veda Področje Podpodročje
1.05.00  Naravoslovje  Biokemija in molekularna biologija   

Koda Veda Področje
P004  Naravoslovno-matematične vede  Biokemija, presnova 
P320  Naravoslovno-matematične vede  Nukleinske kisline, sinteza beljakovin 
P340  Naravoslovno-matematične vede  Lipidi, steroidi, membrane 
Ključne besede
lanosterolna 14alfa-demetilaza, citokrom P450, uravnavanje izražanja genov, transkripcija, biosinteza holesterola, steroli MAS
Vrednotenje (pravilnik)
vir: COBISS
Raziskovalci (5)
št. Evidenčna št. Ime in priimek Razisk. področje Vloga Obdobje Štev. publikacijŠtev. publikacij
1.  18622  dr. Nataša Debeljak  Biokemija in molekularna biologija  Raziskovalec  2002 - 2004 
2.  18992  dr. Martina Fink  Biokemija in molekularna biologija  Raziskovalec  2002 - 2004 
3.  20347  dr. Klementina Fon Tacer  Metabolne in hormonske motnje  Raziskovalec  2002 - 2004 
4.  06135  dr. Radovan Komel  Biokemija in molekularna biologija  Raziskovalec  2002 - 2004 
5.  06013  dr. Damjana Rozman  Biokemija in molekularna biologija  Vodja  2002 - 2004 
Organizacije (1)
št. Evidenčna št. Razisk. organizacija Kraj Matična številka Štev. publikacijŠtev. publikacij
1.  0381  Univerza v Ljubljani, Medicinska fakulteta  Ljubljana  1627066  118 
Povzetek
Lanosterolna 14a-demetilaza (CYP51) je encim, ki pretvarja lanosterol v mejozo aktivirajoči sterol folikularne tekočine FF-MAS. MAS so intermediati v biosintezi holesterola in signalni steroli, ke se kopičijo v gonadah. Izražanja gena CYP51 je uravnavano prvenstveno na nivoju transkripcije. Uravnavanje preko transkripcijskih faktorjev družine SREBP vodi do prekomernega izražanja gena CYP51 koordinirano z drugimi holesterogenimi geni, in vodi do povečane sinteze holesterola v jetrih. V nasprotju z jetri pa v moških spolnih celicah (spermatidah) obstaja od holesterola-neodvisno uravnavanje gena CYP51. Izgleda, de ne-koordinirano uravnavanje celotne poti biosinteze holesterola vodi do kopičenja sterolov MAS. Cilj predlaganega projekta je: 1. študij molekularnih mehanizmov, ki vodijo do sinteze mejozo aktivirajočih sterolov in/ali holesterola, na nivoju uravnavanja izražanja genov, izražanja proteinov, encimskih aktivnosti in znotrajceličnega transporta. Raziskali bomo regulatorne poti, ki so vključene v uravnavanje holesterogenih genov, s poudarkom na uravnavanju gena CYP51. Podrobno bomo raziskali od cAMP-odvisni mehanizem, ki vodi do aktivacije prepisovanja gena CYP51 v spermatidah. Izmerili bomo količino holesterola in njegovih intermediatov v živalskih tkivih in v celičnih kulturah, kjer bomo aktivirali različne signalne poti. Določili bomo aktivnost encima CYP51 v subcelularnih frakcijah spermatid. Pripravili bomo fuzijski protein CYP51 in zelenega fluorescina (CYP51-GFP) in spremljali njegovo znotrajcelično pot. 2. priprava miške s pogojno izničenim genom Cyp51, za ugotavljanje ‘in vivo’ vloge gena CYP51 in sterolov MAS v reprodukciji. Uporabili bomo strategijo Cre/loxP in pripravili miško, ki bo imela gen CYP51 izničen le v spermatidah spolno dozorelih živali, saj bo do izrezovanja prišlo šele po križanju Cyp51loxP samičke s Sycp1-Cre samcem. Razkritje tkivne-specifičnosti sinteze holesterola in sterolov MAS bo prispevalo k boljšemu razumevanju mehanizmov, ki so vključeni v razvoj kardiovaskularnih in reproduktivnih obolenj in lahko privede do razvoja novih strategij zdravljenja.
Zgodovina ogledov
Priljubljeno