Nalaganje ...
Projekti / Programi vir: ARIS

Lanosterol 14alfa demetilaza v biosintezi holesterola in signalnih sterolov

Raziskovalna dejavnost

Koda Veda Področje Podpodročje
1.05.00  Naravoslovje  Biokemija in molekularna biologija   

Koda Veda Področje
P004  Naravoslovno-matematične vede  Biokemija, presnova 
P320  Naravoslovno-matematične vede  Nukleinske kisline, sinteza beljakovin 
P340  Naravoslovno-matematične vede  Lipidi, steroidi, membrane 
Ključne besede
lanosterol 14alfa-demetilaza, citokrom P450, uravnavanje izražanja genov, analiza transkriptoma, tehnologija DNA čipov, funkcijska genomika, biosinteza holesterola, steroli MAS
Vrednotenje (pravilnik)
vir: COBISS
Raziskovalci (12)
št. Evidenčna št. Ime in priimek Razisk. področje Vloga Obdobje Štev. publikacijŠtev. publikacij
1.  17572  dr. Marko Cotman  Veterina  Raziskovalec  2004 - 2007  120 
2.  18622  dr. Nataša Debeljak  Biokemija in molekularna biologija  Raziskovalec  2004 - 2007  249 
3.  18992  dr. Martina Fink  Biokemija in molekularna biologija  Raziskovalec  2004 - 2007  128 
4.  20347  dr. Klementina Fon Tacer  Metabolne in hormonske motnje  Mladi raziskovalec  2004 - 2005  126 
5.  12449  dr. Robert Frangež  Veterina  Raziskovalec  2004 - 2007  280 
6.  24348  dr. Neža Grgurevič  Veterina  Mladi raziskovalec  2004 - 2007  58 
7.  24562  Helena Klavžar  Biokemija in molekularna biologija  Tehnični sodelavec  2004 - 2007 
8.  18355  dr. Drago Kuzman  Fizika  Raziskovalec  2004 - 2007  64 
9.  13330  dr. Gregor Majdič  Veterina  Raziskovalec  2004 - 2007  579 
10.  22459  dr. Tadeja Režen  Nevrobiologija  Mladi raziskovalec  2004 - 2007  245 
11.  06013  dr. Damjana Rozman  Biokemija in molekularna biologija  Vodja  2004 - 2007  893 
12.  24289  dr. Matej Seliškar  Biokemija in molekularna biologija  Mladi raziskovalec  2004 - 2007  25 
Organizacije (3)
št. Evidenčna št. Razisk. organizacija Kraj Matična številka Štev. publikacijŠtev. publikacij
1.  0258  Lek farmacevtska družba d.d.  Ljubljana  1732811  8.018 
2.  0381  Univerza v Ljubljani, Medicinska fakulteta  Ljubljana  1627066  48.524 
3.  0406  Univerza v Ljubljani, Veterinarska fakulteta  Ljubljana  1627139  10.847 
Povzetek
Porušena homeostaza holesterola vodi v hiperlipidemije in predstavlja enega najpogostejših vzrokov smrti v razvitem svetu. V preteklem projektnem obdobju smo naredili velik napredek pri razumevanju mehanizmov sinteze holesterola in intermediatov MAS (mejozo aktivirajoči steroli), na ravni uravnavanja izražanja genov (trans-aktivacija lanosterol 14alfa-demetilaze CYP51 s cAMP stimulusi v pogojih sterolne represije), izražanja proteinov (CYP51 encimska aktivnosti v akrosomalnih membranah spermijev), in znotrajceličnega transporta (prehod iz ER preko Golgijevega aparata do akrosoma). V tem projektnem obdobju bomo izsledke o več-nivojskem uravnavanju gena CYP51 preslikali na druge gene homeostaze holesterola (skupina STEROLTALK) z uporabo pristopov funkcijske genomike (analize transkriptome, proteoma in metaboloma) in študijami interakcij med homeostazo holesterola ter drugimi endogenimi in eksogenimi procesi. Zaradi visoke evolucijske ohranjenosti sinteze in pretvorbe holesterola med sesalci bomo poleg človeških celičnih linij uporabljali tudi živalske modele, od miške (in vivo študije), do velikih sesalcev (bik in oven). Raziskali bomo regulatorne poti, ki so vključene v uravnavanje holesterogenih genov, s poudarkom na tkivni-specifičnosti in signalnih poteh, ki interagirajo s povratno zanko holesterola. Z ekspresijskim profiliranjem z DNA čipi, kvantitativnim PCR in študijami promotorja bomo identificirali fiziološka in patofoziološka stanja, kjer je izražanje holesterogenih genov neodvisno od povratne zanke holesterola. S HPLC bomo izmerili količino holesterola in MAS v živalskih tkivih in v celičnih kulturah, kjer bomo aktivirali različne signalne poti. Z metodami za študije proteoma bomo določiti sestavo CYP51 proteinskih kompleksov na Golgijevem aparatu ter na akrosomalni membrani. Določili bomo aktivnost encima CYP51 v različnih subcelularnih frakcijah, in s konfokalno mikroskopijo spremljali potovanje CYP51-GFP fuzijskega proteina. Raziskali bomo vzroke, ki preprečujejo homologno rekombinacijo cyp-loxP konstrukta v mišji genom in pripravili nove rekombinacijske konstrukte, ki bodo utrli pot do končnega cilja - pogojno ničelne miške s tehnologijo Cre-loxP.
Zgodovina ogledov
Priljubljeno