V preglednem članku smo opisali, kako protieni MACPF/CDC vplivajo na lipidne membrane. Povzeli smo njihove lastnosti zgradbe in delovanja, s poudarkom na tvorbi transmembranskih por.
COBISS.SI-ID: 5056026
V članku smo opisali metodo planarnih lipidnih membran, ki je ena od redkih metod za direktno opazovanje tvorbe transmembranskih por. Opisali smo načine merjenja, najnovejše dosežke na tem področju in kako je bila ta metoda uporabljena pri raziskovanju delovanja od holesterola odvisnih citolizinov.
COBISS.SI-ID: 5308186
Iz gobe Pleurotus ostreatus smo izolirali nativna bi-komponentna proteinska tvorca por ostreolizin A (OlyA) in pleurotolizin B (PlyB) ter pripravili njune rekombinantne različice, da smo preučili njuno vezavo na lipide in mehanizem tvorbe transmembranskih por v naravnih in umetnih lipidnih membranah. Pokazali smo, da se OlyA selektivno veže na membrane s povečano vsebnostjo holesterola in sfingomielina, vendar jih sam ne permeabilizira. DeltaPlyB, z delecijo na N-koncu in z domeno kompleksa komplementa/perforina (MACPF), je spontano oligomeriziral v raztopini in se le šibko in nespecifično vezal na lipide in sam ni permeabiliziral membran. Šele prisotnost OlyA je omogočila vezavo DeltaPlyB na membrane bogate s holesterolom in sfingomielinom in njegovo oligomerizacijo ter tvorbo pore. Na takšnih membranah sta OlyA in DeltaPlyB tvorila pretežno 13-merne krožne oligomere, z zunanjim premerom 19.7 nm in notranjim 4.9 nm, kot smo pokazali z elektronsko mikroskopijo. Takšne pore so, vgrajene v vezikle, lahko dimerizirale s svojimi vrhovi in tako agregirale lipidne vezikle. Zaključili smo, da je OlyA nujen za vezavo na membrane, ki so bogate s holesterolom in sfingomielinom, in za njihovo permeabilizacijo. Na osnovi strukturnih in funkcionalnih lastnosti so te pore zelo podobne tistim, ki jih tvorijo MACPF proteini in od holesterola-odvisni bakterijski citolizini.
COBISS.SI-ID: 26868007