V tem članku poročamo o izolaciji in karakterizaciji visokomolekularne metaloproteinaze s fibrinolitično aktivnostjo, VaF1, iz strupa modrasa (Vipera ammodytes ammodytes). VaF1 in vitro šibko razgrajuje kolagen IV, nidogen in fibronektin, komponente ECM. Predvidoma izraža VaF1 antikoagulantno aktivnost saj hidrolizira fibrinogen, faktor X, protrombin in plazminogen, plazemske proteine, ki so vpleteni v koagulacijo krvi. Celotno aminokislinsko zaporedje prekurzorske oblike VaF1 je bilo določeno s kloniranjem in sekveniranjem njene cDNA. VaF1 je tipična P-IIIa metaloproteinaza. Zanimivo, jo v standardnih eksperimentalnih pogojih antiserum proti celotnemu strupu ne prepozna zato bi lahko VaF1 sodelovala pri postseroterapijskih zapletih, npr. s povzročanjem neučinkovite koagulacije krvi pri zastrupljenem pacientu.
COBISS.SI-ID: 28236839
V tem delu smo opisali novo komponento modrasovega strupa, imenovano VaH3, kot močno hemoragično kačjo metaloproteinazo (SVMP). Molekula je dimerna in jo sestavljata dve identični podenoti mase 53.7 kDa. S proteinskim sekveniranjem in sekveniranjem cDNA zapisa za molekulo smo določili primarno strukturo celotnega proteina. Vsaka podenota je sestavljena iz metaloproteinazne, dizintegrinske in s Cysbogate domene, zato sodi v skupino PIIIc SVMP. Sekvenčno je VaH3 zelo podobna reprolizinom, ki inducirajo apoptozo vaskularnih endotelijskih celic. Antiamoditaginska protitelesa močno navzkrižno reagirajo z VaH3 in popolnoma nevtralizirajo njegovo hemoragičnost v podgani, kljub dejstvu, da ti dve hemoragični PIII SVMP iz strupa modrasa strukturno nista zelo homologni. VaH3 je hitro razgradila nekatere proteine, komponente bazalne membrane, kot tudi nekatere proteine iz krvne plazme, ki so udeleženi pri koagulaciji krvi. Omenjene proteolitske lastnosti zelo verjetno prispevajo k hemoragičnosti VaH3. Zgradili smo tridimenzionalni model VaH3, da bi si z njim pomagali razložiti strukturnofunkcijske povezave pri ADAM/ADAMTS družini proteinov. Ta družina proteinov, z visokim terapevtskim potencialom pri človeku, je strukturno namreč precej podobna VaH3.
COBISS.SI-ID: 26474535
V tem članku smo opisali nov visokomolekularen hemoragin VaH4 v strupu modrasa (Vipera ammodytes ammodytes).Izolirana molekula je kovalentni dimer dveh homolognih podenot, VaH4-A and VaH4-B. Izvedli smo celotno strukturno karakteriacijo podenote VaH4-A, struktura VaH4-B pa je bila določena delno. Obe podenoti spadata v družino P-III kačjih strupnik metaloproteinaz (SVMP). Hemoragična aktivnost te, rahlo kisle SVMP, je pogojena z njeno hidrolizo komponent ECM. VaH4 je tudi medicinsko pommebna, saj je citotoksična rakavim celicam, pa tudi zaradi svoje visoke strukturne podobnosti z ADAM/ADAMTS družino fiziološko zelo pomembnih humanih proteinov z visokim terapevtskim potencialom.
COBISS.SI-ID: 27268903
Strup modrasa povzroči različne patološke učinke pri človeku, najbolj pa sta izražena krvavitev in poškodbe lokalnega tkiva. V tem delu smo opisali sistematično raziskavo komponent strupa,ki povzročajo krvavitve. Odkrili smo encime, ki razgradijo komponente bazalne lamine in zunaj celičnega matriksa, beljakovine v plazmi, ki sodelujejo pri koagulaciji krvi in regulaciji krvnega pritiska, inhibirajo od kolagena, adenozin difosfata in von Willebrandovega faktorjaodvisno agregacije/aglutinacijo trombocitov, aktivirajo faktor IX, faktor X in protrombin ter inhibirajo nastanek protrombinaznega kompleksa. Devet proteinov, ki vplivajo na hemostazo smo detaljno označili. Od teh so štirje potencialno zanimivi za medicinsko uporabo.
COBISS.SI-ID: 27046439
V tem vabljenem preglednem članku smo opisali najbolj pomembne proteine v kačjih strupih, ki prizadenejo hemostatski sistem. Za nekatere med njimi je že bile pokazana medicinska uporabnost. Opisali smo tiste komponente strupov, ki so že dobile status zdravil za lajšanje hemostatskih bolezni ali pa za uporabo v diagnostiki teh bolezni. Za večino proteinov iz kačjih strupov, ki delujejo na hemostazo, pa klinične aplikacije v tem trenutku še niso znane. Članek zaključujemo s opisom najbolj obetavnih potencialnih aplikacij.
COBISS.SI-ID: 24433959