Namen tega dela je bila raziskava citotoksičnosti različnih frakcij zlatih nanodelcev, pripravljenih z ultrazvočno razpršilno pirolizo (USP) iz odpadnega zlata. Za ciljne celice smo uporabili timocite podgan, ki predstavljajo ne-proliferativne celice, in L929 mišje fibroblaste, kot tip proliferativnih celic. Frakciji 1 in 2, ki sta bili sestavljeni iz čistih nanodelcev zlata ter preiskani z vrstičnim elektronskim mikroskopom s kombinacijo energijske disperzijske X-rentgenske analize, nista strupeni za timocite. Vplivali sta le na zmerno zmanjšanje stopnje proliferacijske aktivnosti L929 celic. Opazen je bil zaviralni učinek frakcije 2, ki vsebuje delce manjše velikosti kot frakcija 1. Frakcija 3, ki je bila sestavljena iz Au in z vsebnostjo do 3% Cu ni bila strupena za timocite, a je bila citotoksična za L929 celice. Frakciji 4, ki jo sestavljajo Au in Ag nanodelci ter frakcija 5, sestavljena iz Au skupaj z Cu, Ni, Zn, Fe, sta bili citotoksični za oboje: za timocite in L929 celice. Ti rezultati kažejo, da USP omogoča sintezo nanodelcev čistega zlata z nadzorovano velikostjo, tudi iz ostankov zlata. Vendar pa je pri tem potrebno izvesti mikrostrukturne analize in teste biookompatibilnosti, s čimer lahko upravičimo njihovo pravilno izbiro od bolj citotoksičnih zlatih nanodelcev, ki so onesnaženi z drugimi elementi zlatih zlitin.
COBISS.SI-ID: 14359830
Pripravili smo 5 različnih frakcij nanodelcev iz ostankov zlata z uporabo nove tehnologije t.i. ultrazvočne razpršilne pirolize (USP). Cilj te raziskave je bila karakterizacija mikrostrukture in citotoksičnosti nanodelcev skupaj z njihovimi imuno-modulatornimi lastnostmi. Pri tem smo koristili Con –canvalin A(ConA) obdelan s splenociti podgan kot model aktiviranih imunskih celic. Frakciji 1 in 2 sta bili sestavljeni iz čistih zlatih nanodelcev in sta bili ne-citotoksični, a sta kljub temu zmanjšali celično proliferacijo. Frakcija 2, ki je vsebovala manjše delce, ki so bili tudi manj aglomerirani kot delci frakcije 1, je povzročila »up in down« uravnavanje proizvodnje IL-2 in IL-10 oziroma posledično aktivacijo splenocitov. Frakcija 3, ki je vsebovala nanodelce sestavljene iz Au in Cu do 3 at.%, je bila tudi necitotoksična, a je vseeno povzročila redukcijo IL-2 proizvodnje in celično profileracijo. Frakciji 4 in 5, ki sta bili kontaminiranimi z legirnimi elementi iz ostankov zlata, sta bili citotoksični. Rezultati raziskav so pokazali, da je obseg znižanja citotoksičnosti in kasnejše proizvodnje citokinov, kot tudi način celične smrti, odvisen od sestave nanodelcev. Na ta način smo potrdili, da USP omogoča sintezo nanodelcev zlata, ki bi bili primerni za različne biološke aplikacije, in da ConA-obdelani splenociti predstavljajo zanesljiv model za hitro in natančno oceno imuno-toksikoloških profilov teh delcev. Pri tem je potrebno izpostaviti, da bo predstavljeno USP tehnologijo potrebno izboljšati in podrobneje raziskati nekatere imuno-modulatorne mehanizme z uporabo specifičnejših imunoloških testov.
COBISS.SI-ID: 15970838
Mezenhimske matične celice (MSCs) izolirane iz zdravih zobnih tkiv se raziskujejo kot alternativni vir MSCs za zdravljenje poškodovanega tkiva in vnetnih bolezni. Na tem mestu smo raziskali ali imajo MSCs iz periapikalnih področij (PL-MSCs) imuno-modulatorne lastnosti in posedujejo sposobnost multi -linijske diferenciacije. PL-MSCs, izolirane s kolagenazo /DNA-zo s prebavo kirurško odstranjenih PLs, smo primerjali z MSCs iz ne vnetnih zobnih pulp (DP-MSCs) in zobnega folikla (DF-MSCs) glede na njihov fenotip in prevladujoč diferenciacijski potencial. Protivnetne in imunomodulatorne učinke PL-MSCs smo proučevali (raziskovali) v sodelovanju s kulturo enojedrnih celic periferne krvi in PL-vnetnih celic (PL-ICs). Rezultati PL- MSCs so bili tipični fenotip MSCs, nižje klonogenicitivnosti in samo-obnovitvene stopnje v primerjavi z DF-MSC. Te celice imajo možnost, da se lahko razvijejo v adipocite, osteoblaste in hondrocite podobno celicam in vitro, ki se razlikujejo od tistih DP-MSCs in DF-MSCs. PL-MSCs zavirajo fitohemaglutinin inducirano proliferacijo (širjenje) PB-MNCs in proizvodnjo IL-2 in IL- 5 v so-kulturi, verjetno preko TGF-ß odvisnih mehanizmov. Te celice zahtevajo tudi proizvodnjo IL-1ß, IL-6 in TNF z PL-ICs preko topnih mediatorjev, ker preprečevanje proizvodnje IL-8 zahteva neposreden kontakt (stik) od celice do celice. Diferenciacija (razlikovanje) potencijala PL-MSCs in njihovih imunosupresivnih/protivnetnih lastnosti je lahko koristno pri zdravljenju kroničnih obzobnih bolezni.
COBISS.SI-ID: 16056854