Bistvo izuma je kombinacija uporabe ustrezno-oplaščenih magnetnih nanodelcev (ND) ter ustreznega protokola izpostavitve ND v in vitro kulturi, kar omogoča visok privzem ND v živalske celice, tako v kulture primarnih celic kot v celične linije. Magetni nanodelci so sestavljeni iz magnetnega jedra iz materialov ter so prevelečeni (oplaščeni) z eno ali več plastmi polimerov. Omenjeni protokol in nanodelci omogočajo kopičenje zadoste količine nanodelcev v celicah pri relativno majhnem vplivu na celično preživetje, da ga lahko uporabimo za vrsto aplikacij kot npr.: označevanje in vizualizacijo celic, ki jih lahko sledimo v celični kulturi ali v tkivih ( zelo pomembno pri različnih terapevtskih postopkih v biomedicini kot npr. sledenje migraciji živih celic med regeneracijo tkiva, sledenje matičnim rakavim celicam...); nanodelci omogočajo tudi vizualizacijo z magnetno resonanco (NMR), fluorescenčno in elektronsko mikroskopijo.
F.32 Mednarodni patent
COBISS.SI-ID: 10825556Magnetni nanodelci so že izkazali uporabnost v biotehnoloških aplikacijah. Oplaščenost magnetnih nanodelcev je bistvena za njihovo stabilnost v bioloških okoljih. Cilj magistrske naloge je bil preveriti vpliv s polietilen iminom (PEI) oplaščenih magnetnih nanodelcev (PEI ND) na celično linijo CHO in z dodatnim oplaščenjem z glutationom (PEI-glutation ND) zmanjšati njihovo toksičnost in vitro. Pripravili smo PEI ND in PEI-glutation ND in jim lastnosti določili z metodo dinamičnega sipanja laserske svetlobe ter z merjenjem zeta potenciala. Meritvi dinamičnega sipanja laserske svetlobe in zeta potenciala sta potrdili uspešno dodatno oplaščenje z glutationom. Po izpostavitvi celic CHO nanodelcem smo z diferencialnim barvanjem z barviloma Hoechst in propidijev jodid določali viabilnost, z MTS testom metabolno aktivnost, s standardnim kitom smo merili nastanek reaktivnih kisikovih zvrsti ter s transmisijsko elektronsko mikroskopijo spremljali vstop nanodelcev v celice. Potrdili smo mehanizme toksičnosti, ki jih navaja literatura in pokazali, da z dodatnim oplaščenjem z glutationom zmanjšamo negativen vpliv na viabilnost in metabolno aktivnost celic. Manjša toksičnost je rezultat antioksidativnega delovanja glutationa in zmanjšanja presežka pozitivnega naboja na površini nanodelcev. Reaktivne kisikove zvrsti so se izkazale kot eden izmed mehanizmov, ki vodi v toksičnost PEI ND. S transmisijsko elektronsko mikroskopijo smo pokazali, da PEI ND vstopajo v celico z makropinocitozo, PEI-glutation ND pa tudi s klatrini-posredovano endocitozo.
F.04 Dvig tehnološke ravni
COBISS.SI-ID: 8023929