V okviru programa so v letih 1999-2003 potekale raziskave v dveh sklopih: 1. Študij molekulskih mehanizmov adaptacije halofilnih črnih kvasovk na ekstremne slanosti v okolju in 2.Študije metabolizma steroidov pri evkariontskih mikroorganizmih Odzive na visoke slanosti okolja smo proučevali na halofilnih in halotolerantnih črnih kvasovkah, ki so bile kot prvi primeri gliv izolirane v Sečoveljskih solinah. Kot modelni organizem za proučevanje mehanizmov adaptacije na visoke koncentracije soli smo si izbrali črno kvasovko Horatea werneckii, ki je sposobna rasti v širokem razponu slanosti od 0% do 32% NaCl v mediju. Ugotovili smo, da se halofilni mikroorganizmi odzivajo na povišano slanost s spremembami v sestavi in lastnostih membran-le te so bolj fluidne kot membrane gliv, ki niso adaptirane na okolja z visoko slanostjo. Na ravni transkriptoma smo pri halofilni H.werneckii identificirali 10 diferencialno izraženih genov kot odgovor na spremembe v slanosti okolja in za nekatere pokazali njihovo vlogo pri adaptaciji. Ugotovili smo pomembno vlogo prenosa signala, ki sodeluje v odzivu na povišano koncentracijo NaCl v okolju. Pri H.werneckii smo dokazali obstoj signalne poti, ki je podobna HOG signalni poti pri nehalofilni S.cerevisiae, vendar s pomembnimi razlikami v mehanizmu delovanja. Funkcionalnost ključne kinaze te poti smo pokazali z njenim izražanjem v celicah nehalofilne S.cerevisiae, ki ji ta kinaza manjka. Identifijkacija genov in heterologna ekspresija genov, ki se izražajo kot odziv na prisotnost soli v okolju v mezofilnih organizmih bi lahko imela pomen pri povečanju odpornosti na povišane slanosti zlasti pri ekonomsko pomembnih rastlinah. V okviru raziskav metabolizma in vloge steroidov pri mikroorganizmih smo preučevali 17beta-hidroksisteroid dehidrogenaze (17 b -HSD) pri filamentoznih glivah, mezofilnih in halofilnih kvasovkah. Encim smo izolirali in okarakterizirali pri filamentoznih glivah C.lunatus in P.ostreatus, tako na ravni gena kot na ravni proteina. Delno smo ta encim okarakterizirali tudi tudi pri halofilni črni kvasovki H.werneckii.Pri tej kvasovki smo študirali metabolizem steroidov tudi v smislu vpliva sprememb v slanosti okolja. Razrešili smo tridimenzionalno strukturo in določili mehanizem delovanja 17b-HSDcl. S študijami povezav med strukturo in funkcijo 17b-HSDcl smo razjasnili pomen posameznih aminokilsin za delovanje tega encima. Poznavanje strukture in delovanja 17b-HSDcl kot modelnega encima proteinske naddružine kratkoverižnih dehidrogenaz/reduktaz bo pripomoglo k boljšemu razumevanju proteinov iz te naddružine.