Projekti / Programi
Mikro- in nanodelci v biotehnologiji
| Koda |
Veda |
Področje |
Podpodročje |
| 4.06.00 |
Biotehnika |
Biotehnologija |
|
| Koda |
Veda |
Področje |
| T000 |
Tehnološke vede |
|
rekombinantni proteini, biofarmacevtiki; mikro delci; nano delci; biolistična transformacija; Escherichia coli; Pichia pastoris; TNF-alpha; GFP; inkluzijska telesa; mikro agregacija; makromolekularni agregati; histidinski podaljški;
Raziskovalci (9)
Organizacije (1)
| št. |
Evidenčna št. |
Razisk. organizacija |
Kraj |
Matična številka |
Štev. publikacijŠtev. publikacij |
| 1. |
0104 |
Kemijski inštitut |
Ljubljana |
5051592000 |
20.997 |
Povzetek
Projekt "Mikro in nano delci v biotehnologiji" obsega dva segmenta, ki sta ključna za razvoj modernih biofarmacevtikov. Skupno za oba segmenta je obvladovanje in razvoj tehnologije za pripravo in metod za karakterizacijo mikro in nano delcev uporabnih v moderni biotehnologiji.
Prvi segment posega na področje intracelularne mikroagregacije proteinov, ki vodi do nastanka inkluzijskih teles. Naša že delno potrjena hipoteza je, da lahko pri nekaterih pravilno zvitih proteinih (npr. TNF-alfa) usmerjamo mikroagregacijo ter nastanek inkluzijskih teles z modulacijo hidrofobnosti/hidrofilnosti afinitetnega oligohistidinskega podaljška. Predlagamo torej novo funkcijo in uporabnost oligo-histidinskih afinitetnih podaljškov, ki so doslej služili zgolj za lažjo izolacijo proteina. Nastajanje inkluzijskih teles želimo izrabiti za skladiščenje proteina med biosintezo, cilj pa je predvsem usmerjati in kontrolirati mikroagregacijo in izločanje biološko aktivnih proteinov, ne pa napačno zvitih. Glavni model za oligomerne proteine bo TNF-alfa, za monomerne pa GFP s histidinskimi podaljški na N-koncu proteina. Eden od ciljev je tudi oblikovanje novih tipov "hibridnih" His-podaljškov za zgoraj opisane namene.
Drugi segment se nanaša na pripravo makromolekularnih agregatov (nano delcev) že popolnoma očiščenih rekombinantih proteinov, ki naj bi predstavljali osnovo za nove farmacevtske formulacije. Uporabili bomo izviren pristop kontrolirane in reverzibilne mikroagregacije na osnovi povezovanja molekul preko histidinskih podaljškov ob dodaku kovinskih ionov. Na ta način naj bi dobili proteinske formulacije s podaljšanim delovanjem in večjo stabilnostjo in vivo.
